牡蠣屬于動(dòng)物界第二大門(mén)的軟體動(dòng)物們,擁有厚重的鈣化貝殼,在維護(hù)近海和河口生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定中有不可替代的調(diào)控作用。同時(shí),牡蠣作為養(yǎng)殖產(chǎn)量最大的海洋動(dòng)物,是重要的海洋蛋白源,與人類生活和健康息息相關(guān)。牡蠣含有豐富的?;撬?、甘氨酸、丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸和脯氨酸,8種必需氨酸占40%左右,是一種富含蛋白質(zhì)的物質(zhì)。重要的生態(tài)意義及經(jīng)濟(jì)價(jià)值、獨(dú)到的生物學(xué)特性使牡蠣成為海洋生物學(xué)研究的重點(diǎn),且逐漸發(fā)展成為海洋生物逆境適應(yīng)機(jī)制研究的模式種。
隨著海洋資源的不斷深入,來(lái)源于生物酶解技術(shù)制備得到海洋生物的小肽,因其分子量小,生物效價(jià)高,生理活性好、穩(wěn)定性好、安全易攜帶等優(yōu)勢(shì)而收到廣泛關(guān)注。
獲得牡蠣肽的主要方法有化學(xué)法、化學(xué)合成法、酶解制備法等,化學(xué)提取法需要用到酸和堿,易破壞肽的空間結(jié)構(gòu)且得率低,故較少使用?;瘜W(xué)合成的多肽費(fèi)用昂高,分離提純的成本較高,多用于多肽的藥理功能驗(yàn)證以及在大型藥企中用于大規(guī)模生產(chǎn)和中試使用。酶解制備法是目前獲得功能活性肽最常用和最有效的方法,它是一種通過(guò)適當(dāng)?shù)牡鞍酌杆獾鞍踪|(zhì)制備功能活性肽的方法。該方法的優(yōu)勢(shì)在于制備條件溫和、反應(yīng)高效、蛋白質(zhì)回收率高、易于控制,且具有一定的專一性。蛋白酶的選擇是影響酶解過(guò)程中至關(guān)重要的因素,由于不同酶的酶切位點(diǎn)各不相同,在不同酶解工藝條件下可以得到功能活性各異的牡蠣蛋白肽。
有研究表明,使用木瓜蛋白酶和中性蛋白酶直接處理鮮牡蠣肉,得到具有抗氧化活性的牡蠣肽。經(jīng)蛋白酶水解后的牡蠣,水解度25.6%左右時(shí),小分子肽分布在低于1kDa占比超過(guò)20%,并且,蛋白質(zhì)回收率為70.95%左右,均為最優(yōu),因此選擇木瓜蛋白酶和中性蛋白酶對(duì)牡蠣進(jìn)行酶解,得到的牡蠣蛋白肽具有較高的抗氧化活性。牡蠣蛋白活性肽(又稱牡蠣肽)是天然提取的小分子蛋白肽,有利于人體吸收并方便儲(chǔ)存,同時(shí)具有穩(wěn)定的多樣化活性。
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